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細(xì)胞培養(yǎng)中常用的纖維粘連蛋白你了解多少
更新時間:2019-01-28   點擊次數(shù):901次

纖維粘連蛋白,英文名Fibronectin,是1974年國外研究發(fā)現(xiàn)的一種高分子糖蛋白,具有多種生物學(xué)功能。纖維粘連蛋白廣泛存在于胞表面蛋白和血漿中,細(xì)胞膜表面受體和細(xì)胞外基質(zhì)成分結(jié)合。國內(nèi)外的大量研究結(jié)果證明,纖維粘連蛋白分子在進化過程中保守性很強,各種動物體液中的纖維粘連蛋白具有非常相近的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)和生物學(xué)功能,因而不同來源的纖維粘連蛋白可以相互替代使用。

纖維粘連蛋白,sciencell,8248

纖維粘連蛋白的功能主要有如下兩方面表現(xiàn):

1、作為生化試劑,為細(xì)胞培養(yǎng)和生物工程的工業(yè)化應(yīng)用提供基礎(chǔ)。纖維粘連蛋白的很多功能中,基本重要的一項是促進細(xì)胞的黏連生長,而細(xì)胞的黏連是機體結(jié)構(gòu)得以維持、細(xì)胞生長完成的必要條件。

2、應(yīng)用于多種疾病的診斷和治療。如傷口的修復(fù)和愈合,癌癥的診斷和治療,血液系統(tǒng)和心腦血管系統(tǒng)疾病的治療,敗血癥、休克等急救的輔助治療等。

我國對纖維粘連蛋白的應(yīng)用研究起步較晚,目前國內(nèi)纖維粘連蛋白主要從國外進口。美國ScienCell實驗室的纖維粘連蛋白(貨號# 8248)使用親和色譜法提純,是促進細(xì)胞貼壁和延伸生長的理想基質(zhì)。細(xì)胞粘附檢測表明,與對照組相比,使用0.1ug/cm2纖維粘連蛋白包被培養(yǎng)瓶能顯著地促進內(nèi)皮細(xì)胞貼壁生長。

在細(xì)胞培養(yǎng)中纖維粘連蛋白包被說明:

1、使用無血清、無鈣鎂離子的培養(yǎng)基或平衡中性溶液稀釋纖維粘連蛋白,推薦包被濃度為1-5ug/cm2,jia濃度取決于細(xì)胞類型。

2、37℃孵育1小時或4度冰箱過夜。

3、回收培養(yǎng)瓶中的纖維粘連蛋白,包被液可重復(fù)使用2-3次,注意不要污染。用去離子水沖洗培養(yǎng)瓶2遍。培養(yǎng)瓶即可使用,但包被好的培養(yǎng)瓶不要放置超過24h。

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